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抗体の選択

サンドイッチ法によるELISA（酵素免疫測定法）は、直接法や競合法といったほかの方法と比べて検出精度が高い利点があります。
一方で、適切な抗体の組み合わせを選択する必要があり、一から組み合わせの検証を行うのは容易ではありません。

自らサンドイッチ法の抗体ペアを選択する場合、以下の点を考慮する必要があります。

①　捕捉抗体と検出抗体が別々のモノクローナル抗体
・抗体が検出するエピトープが異なり、位置が重ならないような組み合わせ

②　捕捉抗体と検出抗体が同一のモノクローナル抗体
・抗原上に同一のエピトープが複数存在しているか

③　捕捉抗体または検出抗体にポリクローナル抗体を使用する際
・交差反応で余計なものまで検出してしまわないか

一般的に、高い感度を求める場合は捕捉抗体にポリクローナル抗体を選択し、検出抗体にモノクローナル抗体を選択します。高い特異度を求める場合は、両方の抗体にモノクローナル抗体を選択します。

ViroStat社が提供する各種抗体のうち、サンドイッチ法での有用性が検証済みの
捕捉抗体と検出抗体の組み合わせを以下にご紹介いたします。

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ViroStat社製ベストマッチ抗体

対象	Host	捕捉抗体		検出抗体		抗体結合部位（エピトープ）
		型番	Igクラス	型番	Igクラス
Influenza A	Mouse	1331	IgG1	1371	IgG1	nucleoprotein
Influenza B	Mouse	1171	IgG2b	1131	IgG2b	nucleoprotein
	Mouse	1161	IgG2b	1131	IgG2b	nucleoprotein
Respiratory Syncytal Virus	Mouse	0631	IgG2a	0635	IgG1	fusion protein
	Mouse	0631	IgG2a	0651	IgG2a	fusion protein
Group A Streptococcus	Rabbit	1511	polyclonal	0435	IgG1	carbohydrate
	Goat	1501	polyclonal	0435	IgG1	carbohydrate
Group B Streptococcus	Rabbit	1525	IgG1	1525	IgG1	carbohydrate
Adenovirus	Mouse	1431	IgG1	1461	IgG1	hexon*1
	Mouse	1431	IgG1	1411	IgG2a	hexon*1
Metapneumovirus	Mouse	4811	IgG1	4821	IgG2a	matrix protein
Rotavirus	Mouse	0531	IgG2b	0581	IgG2b	capsid
Clostridium difficile	Mouse	5150	IgG2a	5154	IgG1	toxin A
	Mouse	5156	IgG1	5158	IgG1	toxin B
Clostridia GDH	Mouse	5186	IgG1	5187	IgG2b	GDH
Hepatitis B surface Ag	Mouse	1834	IgG2a	1837	IgG2a	surface antigen (Ad/Ay)
	Mouse	1835	IgG2a	1837	IgG2a	surface antigen (Ad/Ay)
Escherichia coli O157	Mouse	1023	IgG2b	1022	IgG1	O157
	Mouse	1022	IgG1	1061	IgG3	O157
Campylobacter jejuni	Mouse	7721	IgG1	7721	IgG1	100 kDa
Helicobacter pylori	Mouse	6641	IgG1	6641	IgG1	54 kDa (flagellin)
	Mouse	6641	IgG1	6651	IgG1	54 kDa (flagellin)
Dengue NS1	Mouse	5162	IgG1	5165	IgG1	NS1
Norovirus genogroup II	Mouse	4935	IgG1	4933	IgG1	GII
Plasmodium falciparum	Mouse	3564	IgG2a	3567	IgG2a	HRP2
Salmonella sp. LPS core	Mouse	6391	IgG2a	6393	IgG3	common core*2
	Mouse	6391	IgG2a	6394	IgG2b	common core*2
Listeria sp.	Mouse	4219	IgG2b	4217	IgG2b	flagella*3
Giardia lamblia	Mouse	6281	IgG1	6231	IgG1	65 kDa
	Mouse	6271	IgG3	6231	IgG1	65 kDa
Legionella pneumophila	Rabbit	6051	polyclonal	6029	IgG3	LPS
Cholera Toxin	Mouse	7953	IgG1	7953	IgG1	B subunit
Chlamydia sp. LPS	Mouse	1645	IgG2b	1644	IgG2b	LPS
Salmonella Typhi	Mouse	6345	IgG2a	6345	IgG2a	LPS
Herpes simplex 1 & 2	Mouse	0195	IgG1	0197	IgG2a	gD
Zika virus	Mouse	5122	IgG1	5125	IgG1	NS1
Trichomonas vaginalis	Mouse	7141	IgG3	7151		T. vaginalis
Candida albicans	Rabbit	6405	IgG1	6405	IgG1	Candida sp.*4
Aspergillus sp.	Rabbit	5145	IgG	5145	IgG	secreted hyphal antigen*5
Mycobacterium tuberculosis	Mouse	5179	IgG	5180	IgG	LAM*6

 

*1) 1431: Known reactivity with 34 serotypes of Adenovirus including types 40 & 41. 1461: Known reactivity with at least 21 serotypes of Adenovirus including types 40 & 41. 1411: Known reactivity with serotypes :1, 2, 3, 4, 5, 6, 7a, 8, 11, 14, 20, 21, 26, 31, 40 & 41.

*2) Positive for all Salmonella O-serogroups tested: A, B, C1, C2, D, E1, E3, E4, F, G1, G2. Negative for E. coli (mix), Klebsiella, Citrobacter, Pseudomonas, Yersinia, Shigella, Proteus & Legionella.

*3) Reactive with L. monocytogenes serotypes 1/2a, 1/2b, 3b, 1/2c, 3a, 4a, 4b, 4c, 4d, 4e plus L. innocua, L. ivanovii, L. welshimeri & L. seeligeri. 

*4) Reactive with C. albicans (10 strains), C. parapsillosis, C. glabrata, C. tropicales & C. auris. Negative for C. krusei.

*5) Reactive with 9 Aspergillus species including 6 strains of A. fumigatus.

*6) Reactive with: Mycobacterium tuberculosis (6 strains), M. bovis, M. smegmatis, M. leprae, M. avium, M. phlei & M. parafortuitum.